UV-spektrofotometer er et måleinstrument, der bruger diskontinuerlige bølgelængder til at prøve reflekterende eller transmissive objekter. På grund af de forskellige strukturer af molekyler i forskellige objekter varierer deres evne til at absorbere lys af forskellige bølgelængder også. Derfor har hvert objekt et specifikt absorptionsspektrum. Instrumentet, der kan adskille hvert monokromatisk lys fra blandet lys indeholdende forskellige bølgelængder og måle dets intensitet kaldes et spektrofotometer.
Hvad kan et UV-spektrofotometer bruges til at måle?
1. Bestem indholdet af stoffer i opløsningen
Mål absorbansen af standardopløsning (opløsning med kendt koncentration) og ukendt opløsning (opløsning med koncentration, der skal måles) og sammenlign dem, da tykkelsen af den anvendte absorptionscelle er den samme. Alternativt kan absorbansen af forskellige koncentrationer af standardopløsning måles først, og der kan tegnes en standardkurve. Inden for det valgte koncentrationsområde skal standardkurven være en ret linje. Derefter kan absorbansen af den ukendte opløsning måles, og dens tilsvarende koncentration kan findes fra standardkurven.
2. Identifikation af forbindelser ved hjælp af UV-spektroskopi
Brug monokromatisk lys af forskellige bølgelængder til at passere gennem en opløsning af en vis koncentration, mål absorbansen af hvert monokromatisk lys i opløsningen, og plot derefter absorbansbølgelængdekurven med bølgelængde som den vandrette akse og absorbans som den vertikale akse. Denne kurve er absorptionsspektrumkurven. Forskellige stoffer har deres egne absorptionsspektrumkurver, så identifikation af stoftyper kan foretages ved hjælp af absorptionsspektrumkurver.