+86-312-6775656

De fem hovedkomponenter i en væskekromatograf

Nov 29, 2023

De fem hovedsystemer i en væskekromatograf er som følger:

1. Indsprøjtningssystem

Generelt bruges en membraninjektionsprøvetager eller højtryksinjektionsrum til at fuldføre injektionsoperationen, og injektionsvolumenet er konstant.

Dette er en fordel for at forbedre reproducerbarheden af ​​analytiske prøver.

2. Infusionssystem

Systemet består af tre dele: en højtrykspumpe, et mobilfasereservoir og en gradienter. Det generelle tryk for en højtrykspumpe er 1,47~4,4X107Pa, og flowhastigheden er justerbar og stabil. Når højtryksmobilfasen passerer gennem kromatografikolonnen, kan den reducere diffusionseffekten af ​​prøven i kolonnen og accelerere dens bevægelseshastighed i kolonnen. Dette er gavnligt for at forbedre opløsning, genvinde prøven og opretholde prøvens biologiske aktivitet. Mobilfaselagringsfejl og gradienter kan ændre den mobile fase i henhold til egenskaberne af den stationære fase og prøven, herunder ændring af eluentens polaritet, ionstyrke, pH-værdi eller skift til andre metoder

3. Adskillelsessystem

Systemet omfatter kromatografisøjler, forbindelsesrør og termostater.

Længden af ​​en kromatografisk søjle er generelt 10-50cm (hvis to er nødvendige i kombination, kan der tilføjes et forbindelsesrør mellem de to), med en indre diameter på 2-5mm. Den er lavet af højkvalitets rustfrit stål, tykvæggede glasrør, titanlegering og andre materialer. Søjlen er udstyret med en diameter på 5-10 μ En fast fase med en partikelstørrelse på m (sammensat af matrix og fast væske), hvor matrixen er sammensat af høj mekanisk styrke harpiks eller silicagel, som begge er har karakteristika af inerthed (såsom den grundlæggende fjernelse af silikatgener på overfladen af ​​silicagel), porøsitet og stort specifikt overfladeareal. Derudover er dens overflade mekanisk belagt (svarende til fremstilling af stationære faser i gaskromatografi) eller kemisk koblet med forskellige gener (såsom phosphat, kvaternær amin, hydroxymethyl, phenyl, amino eller alkylgrupper med forskellige længder af carbonkæder) eller ligander.

Derfor har disse typer stoffer med forskellige faste relative strukturer god selektivitet. For eksempel ved at koble ærtelektin (PSA) på overfladen af ​​porøs silicagel, kan et glycoprotein isoleres fra fibroblaster. Derudover er det stationære fase-plasmid lille, og søjlelaget er let at opnå en ensartet og tæt tilstand, hvilket i høj grad kan reducere hvirvelstrømsdiffusionseffekten. Matrixen har lille partikelstørrelse og lavvandede mikroporer, og prøven har kort masseoverførsel i det mikroporøse område. Disse er gavnlige til at reducere båndbredden og forbedre opløsningen. Ifølge kolonneeffektivitetsteorianalysen, jo mindre matrixpartikelstørrelsen er, jo større er bakkens teoretiske antal N.

4. Detektionssystem

Der er tre almindeligt anvendte detektorer til væskekromatografi: UV-detektor, differentialbrydningsindeksdetektor og fluorescensdetektor

UV-detektor

Denne detektor er velegnet til at detektere prøver med absorptionsevne for ultraviolet (eller synligt lys) lys.

Dens karakteristika: bred vifte af anvendelser (såsom proteiner, nukleinsyrer, aminosyrer, nukleotider, peptider, hormoner osv. kan bruges); Høj følsomhed (detektionsgrænse på 10-10g/mL); Bredt lineært område; Ikke følsom over for ændringer i temperatur og strømningshastighed; Kan detektere prøver elueret med gradientopløsning.

5. Databehandlingssystem

Dette system kan indsamle, lagre, vise, udskrive og behandle testdata, hvilket muliggør korrekt adskillelse, forberedelse eller identifikation af prøver.

Sammenfattende består væskekromatografen af ​​et prøvesystem, et infusionssystem, et separationssystem, et detektionssystem og et databehandlingssystem. Kombinationen af ​​disse systemer gør eksperimentet mere pålideligt og stabilt.

Send forespørgsel